Abstract: . . .  zu untersuchen und den zugrundeliegenden Pathomechanismus aufzuklren. Dabei sollten folgende Analysen der Herzen in CTSL-defizienten Tieren vorgenommen werden: 1. zeitabhngige morphologische, funktionelle und ultrastrukturelle Untersuchungen 2. Festlegen eines Alters fehlender physiologischer Anzeichen einer DCM in ctsl -/- defizienten Tieren 3. Differentielle Transkriptomanalyse von Herzen dieses Alters, um Aufschluss ber die . . .
. . .  Einfrieren von Bakterien 900 l einer 100-500 ml Bakterienkultur wurden mit 100 l DMSO gemischt und zur Lagerung bei 80C eingefroren. Page 31 Methoden 29 4.3 Elektrophoresetechniken zurAuftrennung von DNA und RNA 4.3.1 Agarose-Gelelektrophorese Die Auftrennung von DNA Fragmenten unterschiedlicher Gre erfolgte mit Agarose- Gelelektrophorese. Die Agarose-Konzentration richtet sich dabei nach der Gre der zu  . . .
. . .  der Keratinozyten in der epidermalen Basalzellschicht. Interessanterweise konnte fr die phnotypisch identische furless Maus (Green, 1954) eine spontane Mutation im ctsl Gen festgestellt werden (Roth et al., 2000). Die molekulare Pathogenese des Haarphnotypes ist bisher nicht vollstndig aufgeklrt. Auerdem wurde - wie oben beschrieben - in ctsl -/- Musen eine Strung der positiven Selektion der CD4-positiven T-Zellen im Thymus festgestellt. Man . . .
. . .  trennenden DNA-Fragmente: Agarose Konzentration (%) Trennbereich (kb) 0,6 20-1 0,9 7-0,5 1,2 6-0,4 1,5 4-0,2 2,0 3-0,1 Die erforderlicher Menge Agarose wurde in 150 oder 400 ml TAE Puffer aufgekocht und nach dem Abkhlen mit Ethidiumbromid versetzt (Endkonzentration 0,2 g/ml), in einen Geltrger gegossen und bei RT auspolymerisiert. Die Proben (25-40 l) wurden mit 6x Auftragpuffer (siehe 3.6) versetzt . . .
. . .  der Transkription zu erhalten 4. Proteomanalyse der Organellen aus dem Herzgewebe 5. Generierung einer transgenen Maus um Cathepsin L gezielt in Kardiomyozyten zu exprimieren und zu untersuchen, ob der primre Effekt der dilatativen Kardiomyopathie in den Kardiomyozyten begrndet liegt Page 19 Material 16 3 Material 3.1 Antikrper und acidophile Farbstoffe Alexa Fluor 488 goat anti-rabbit . . .
. . .  zu erhalten 4. Proteomanalyse der Organellen aus dem Herzgewebe 5. Generierung einer transgenen Maus um Cathepsin L gezielt in Kardiomyozyten zu exprimieren und zu untersuchen, ob der primre Effekt der dilatativen Kardiomyopathie in den Kardiomyozyten begrndet liegt Page 19 Material 16 3 Material 3.1 Antikrper und acidophile Farbstoffe Alexa Fluor 488 goat anti-rabbit Molecular . . .
--3000,6,250,3431,64020