Abstract: . . .  Granula) aktiviert wird, wurden hierzu Untersuchungen durchgefhrt. Weiterhin wurden Experimente zur Regulation der Syk- Aktivierung whrend des shape change und zur Funktion von Syk fr den Formwandel unternommen. Auerdem wurde die Funktion und Regulation von Syk whrend der Thrombozytenaggregation und -ausbreitung ( spreading ) untersucht. Hier sollte mit biochemischen und zellbiologischen Methoden die Signaltransduktionskette ausgehend von der Aktivierung des . . .
. . .  vermehrt. Aufbewahrt wurden smtliche Bakterienstmme in LB-Medium mit 20% (v/v) Glycerin bei 80C oder bei 4C auf LB- Agar-Platten. Isolierung von Plasmid-DNA Die Glycerinkultur der jeweiligen Klone wurde aus -80C kurz angetaut und eine kleine Menge davon mit einer sterilen Impfse auf einer LB-Agar-Platte ausgestrichen. Nach einer Trocknungszeit von 5 - 10 min bei Raumtemperatur wurde die Agarplatte ber Nacht bei 37C inkubiert. Am darauffolgenden Tag wurden . . .
. . .  wird, wurden hierzu Untersuchungen durchgefhrt. Weiterhin wurden Experimente zur Regulation der Syk- Aktivierung whrend des shape change und zur Funktion von Syk fr den Formwandel unternommen. Auerdem wurde die Funktion und Regulation von Syk whrend der Thrombozytenaggregation und -ausbreitung ( spreading ) untersucht. Hier sollte mit biochemischen und zellbiologischen Methoden die Signaltransduktionskette ausgehend von der Aktivierung des Integrins a . . .
. . .  mit einer sterilen Impfse auf einer LB-Agar-Platte ausgestrichen. Nach einer Trocknungszeit von 5 - 10 min bei Raumtemperatur wurde die Agarplatte ber Nacht bei 37C inkubiert. Am darauffolgenden Tag wurden 1 - 3 ml LB-Medium mit einer von der Agar-Pl . . .
. . .  mit kardiovaskulren Erkrankungen. Da in der Arbeitsgruppe gefunden wurde, da mox-LDL Lysophosphatidsure (LPA) enthlt und Plttchen ber die Aktivierung von LPA-Rezeptoren stimuliert werden, wurde die frhe Aktivierung und Regulation der Tyrosinkinase Syk auch nach Aktivierung der Thrombozyten durch LPA untersucht. Da unklar war, ob Syk whrend der frhen Phase der Thrombozytenaktivierung, d.h. whrend des Formwandels (ohne Sekretion von Inhaltsstoffen aus den Granula) . . .
. . .  Vektor (Geschenk Dr. S.P. Watson, Oxford) isoliert und mit dem bait -Vektor pAS2-1 ligiert (Syk full-length). Desweiteren wurde eine Kinase-inaktive Mutante (Geschenk Dr. S.J. Shattil, La Jolla) in den bait -Vektor pAS2-1 eingefgt (Syk kinase dead). Im folgenden werden die grundlegenden Arbeitsmethoden mit E.coli erklrt (ausfhrliche Protokolle hierzu s. Clontech Handbuch): Bakterienanzucht LB-Medium: 1% (w/v) Bacto-Tryptone, 0,5% (w/v) Bacto-Hefeextrakt, . . .
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